客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR試劑盒技術：
產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
樣品RNA的抽提：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
2,2'-亞甲基雙(6-叔丁基-基酚)(>98.0%(GC))羥基異喹啉

2,2'-亞甲基雙(6-叔丁基對甲酚)(>99.0%(GC))叔丁氧羰基氨基哌啶-1,二羧酸-1-芐酯

亞甲基二水楊酸(異構體的混合物)(>90.0%(T))溴 -6,7-二甲氧基喹啉

4,4'-亞甲基雙(2-)(>98.0%(T))溴-6-氨基喹啉

4,4'-亞甲基雙(2,6-二甲酚)(>98.0%(GC))溴-6-甲氧基喹啉

2,2'-亞甲基雙(四酚)(>90.0%(GC))溴-6-喹啉

4,4'-亞甲基雙(2-基-6-)(>98.0%(GC)(T))溴-7-甲氧基喹啉

4,4'-亞甲基雙(2-酚)(>95.0%(GC))溴-7-喹啉

2-氨基-2',5-二二甲酮(>98.0%(N))溴-7-羥基喹啉

氧基-2-羥基二甲酮(>97.0%(HPLC)(T))溴-8-甲氧基喹啉

甲酮-2,4'-二甲酸一水合物(>98.0%(T))溴-8-喹啉

3,3',4,4'-二酮四羧酸二酐(>96.0%(T))溴-8-羥基喹啉

甲酰-4'-甲基二硫(>98.0%(GC))溴吡啶-2-甲酸酯

4,4'-雙(甲氨基)二甲酮(>98.0%(T))溴吡啶-2-甲酰

二甲酮-4,4'-二甲酸(>95.0%(HPLC)(T))羥基-7-甲氧基喹啉-甲酸酯

2,4'-二二甲酮(>99.0%(GC))7--羥基喹啉

2,2'-二羥基-4,4'-二甲氧基二甲酮(>90.0%(GC))7--羥基喹啉-羧酸

4,4'-二羥基二甲酮(>98.0%(GC)(T))7--1,二氫-氧代-喹啉羧酸酯
疙瘩皮膚病病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒結締組織生長因子抗體Phospho-MYPT1 (Thr696) /FITC  熒光素標記酸化肌球蛋白酸酶抗體IgG100 ul

細胞毒性T細胞抗原-4抗體Phospho-MYPT1 (Thr853) /FITC  熒光素標記酸化肌球蛋白酸酶抗體IgG100 ul

降鈣素受體抗體MYL1/MYL2 /FITC  熒光素標記肌球蛋白輕鏈1/2抗體IgG100 ul

1號染色體開放閱讀框38抗體Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC  熒光素標記酸化肌球蛋白輕鏈2抗體IgG20 ul

脫羧酶蛋白體36抗體MYL3/Myosin light chain 3 /FITC  熒光素標記肌球蛋白輕鏈3抗體IgG100 ul

間隙連接蛋白40抗體MYL3/Myosin light chain 3/Biotin   生物素標記 肌球蛋白輕鏈3抗體IgG100 ul

間隙連接蛋白43抗體MLH1/FITC  熒光素標記錯配修復蛋白1抗體IgG100 ul

間隙連接蛋白45抗體MMP-1/FITC   熒光素標記基質金屬蛋白酶-1抗體IgG20 ul

細胞表面趨化因子受體1抗體MMP-1/FITC  熒光素標記基質金屬蛋白酶-1抗體100 ul
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。